乙肝治療性疫苗的研究現(xiàn)狀

添加日期：2010年3月12日 閱讀：1174

　　一、治療性疫苗的概念
　　二、乙型肝炎治療性疫苗
　　(一)蛋白疫苗
　　蛋白疫苗是目前研究*為深入的治療性疫苗，其主要原理是將乙型肝炎病毒(HBV)衣殼蛋白(如preS1，preS2，S)或核心抗原(HBcAg)進(jìn)行一定的修飾后接種給患者。由于HBV衣殼蛋白和核心抗原均具有較強(qiáng)的抗原性，因此會誘發(fā)較強(qiáng)的特異性細(xì)胞免疫。目前研究較多的有亞單位疫苗、抗原抗體復(fù)合物疫苗和基于表位的疫苗。
　　Pol等采用preS2/S疫苗治療慢性乙型肝炎，治療6個月后，疫苗組和對照組血清HBV DNA陰轉(zhuǎn)率分別為15%和2.7%。值得注意的是，治療前血清HBV DNA大于200 mg/L的患者，疫苗組和對照組血清HBV DNA陰轉(zhuǎn)率分別為16.7%和0%。在治療第6～12個月之間，疫苗組血清HBV DNA下降幅度顯著大于對照組。但是，在治療12個月后，疫苗組和對照組血清HBV DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg/抗HBe轉(zhuǎn)換率無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　HBV核心抗原具有相當(dāng)強(qiáng)的免疫原性和抗原性。在慢性HBV感染過程中，HBeAg是**能引發(fā)顯著免疫反應(yīng)的抗原，將核心蛋白與preS1的優(yōu)勢表位連接，能獲得較為理想的疫苗。Chen等運(yùn)用基因工程技術(shù)將preS1抗原蛋白的第3～55位氨基酸連接在截短的HBcAg羧基端，制成一種被稱為“HBVCS1”的重組抗原，對小鼠進(jìn)行免疫后測定其抗體滴度，發(fā)現(xiàn)小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了強(qiáng)烈的抗-HBc免疫應(yīng)答和中等程度的抗preS1免疫應(yīng)答，表明preS1的融合并不影響HBcAg的抗原性和免疫性，提示HBVCS1可能有作為乙型肝炎的治療性疫苗的潛力。
　　Wen等將HBsAg和抗-HBs抗體連接起來，組成了抗原-抗體復(fù)合物，與單獨使用HBsAg相比，抗原-抗體復(fù)合物顯著增加了免疫的效率。其機(jī)制可能是由于抗原-抗體復(fù)合物中的Fc段與抗原提呈細(xì)胞膜表面受體結(jié)合，加速其對抗原的加工和提呈，同時促進(jìn)Thl型細(xì)胞因子IFN-γ 的分泌，進(jìn)而誘發(fā)更為強(qiáng)烈的細(xì)胞免疫應(yīng)答。他們用抗原-抗體復(fù)合物治療了l4例慢性乙型肝炎患者，治療6個月后，血清HBV DNA和HBeA轉(zhuǎn)陰率分別為64.3%和42.9%。Wen等進(jìn)一步用乙型肝炎表面抗原-抗體免疫復(fù)合物(yeast-derived hepatitis B surface antigen-antibody immunogenic complex，YIC)制成疫苗進(jìn)行臨床試驗，第*階段有22名志愿者分3組分別注射YIC 30μg、60μg、90μg，第二階段有9名志愿者分6次注射YIC 90μg，結(jié)果，所有受試者對YIC均可耐受，肝功能和腎功能檢測均未發(fā)現(xiàn)異常，同時產(chǎn)生了*高達(dá)1000 mIU/L的抗-HBs并伴有血清IFN-γ和IL-2水平升高，而血清IL-4、IL-6、IL-l0和TNF-α沒有顯著升高。提示YIC不僅有很強(qiáng)誘導(dǎo)產(chǎn)生抗-HBs的能力，而且有很好的安全性。*近的Ⅱ期臨床試驗比較了YIC 30μg、60μg和鋁佐劑，每4周一次，療程24周治療慢性乙型肝炎的初步療效。結(jié)果，療程結(jié)束時，YIC30μg組、60μg組和鋁佐劑組HBeAg血清轉(zhuǎn)換率相近，沒有統(tǒng)計學(xué)差異;但療程結(jié)束后隨訪24周末，YIC60μg組和鋁佐劑組HBeAg血清轉(zhuǎn)換率分別為21.8% (17/78) 和9% (7/78)，95%可信限1.5%～24.1%，有統(tǒng)計學(xué)差異。YIC30μg組、60μg組和鋁佐劑組不良事件的發(fā)生率相近，分別為5.1%、3.6%和5.0%。
　　基于抗原并非直接刺激淋巴細(xì)胞，而是經(jīng)由抗原提呈細(xì)胞加工成為抗原表位后呈遞給淋巴細(xì)胞，進(jìn)而激活淋巴細(xì)胞的原理，Heathcote等制成一種脂蛋白疫苗。脂蛋白疫苗的組成包括HBcAg的優(yōu)勢CTL表位18～27位氨基酸肽鏈和能被CD4 Th細(xì)胞識別的破傷風(fēng)類毒素830～843位氨基酸肽鏈以及2個棕櫚酸分子。動物實驗證明，脂蛋白疫苗能有效地誘發(fā)特異性抗-HBc細(xì)胞毒應(yīng)答。有19例慢性乙型肝炎患者接受脂蛋白疫苗治療并未觀察到有毒副作用，但其產(chǎn)生的細(xì)胞毒反應(yīng)只有實驗動物的1/10，而且對血清HBV DNA陰轉(zhuǎn)率、HBeAg/抗HBe轉(zhuǎn)換比率沒有顯著影響。
　　(二)基因疫苗
　　研究指出，某些細(xì)胞因子如IL-2、IL-12、IFN-γ能使慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平降低。在DNA疫苗中引入細(xì)胞因子佐劑，可增強(qiáng)免疫反應(yīng)并改變T細(xì)胞應(yīng)答的方向，引導(dǎo)其向Th1的方向發(fā)展。Yang等設(shè)計了一種包含大部分HBV抗原(HBsAg， preS1/S2，HBeAg，HBcAg)及IL-12基因的DNA疫苗，與拉米夫定聯(lián)合治療了12例慢性乙型肝炎患者，酶聯(lián)免疫印跡顯示，它能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的分泌IFN-γ的T細(xì)胞反應(yīng)，并使50%患者血清HBV DNA降低至不可檢測水平，而且不伴有血清丙氨酸轉(zhuǎn)移酶的升高。
　　Mancini等用編碼preS2/S蛋白的重組質(zhì)粒接種10例慢性乙型肝炎患者，結(jié)果，有2例患者的外周血單個核細(xì)胞發(fā)生了抗原特異性的T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)，并且抗-HBV特異性的分泌IFN-γ的T細(xì)胞數(shù)目大幅度提高;有5例患者血清HBV DNA水平出現(xiàn)了暫時性下降。他們隨后設(shè)計了臨床I期試驗來評價表達(dá)HBsAg和preS2/S的DNA疫苗的安全性、耐受性和免疫原性，10例HBeAg陽性的慢性乙型肝炎患者接受了DNA疫苗治療。結(jié)果，經(jīng)3次疫苗注射后，所有患者耐受性良好，全部患者產(chǎn)生了抗-HBs特異性T細(xì)胞，50%的患者產(chǎn)生了抗-preS2特異性T細(xì)胞。
　　(三)細(xì)胞疫苗
　　荷載HBV相關(guān)抗原的DC可能有效打破免疫耐受，恢復(fù)細(xì)胞免疫應(yīng)答和清除HBV。Akbar等將小鼠脾臟DC在體外擴(kuò)增后荷載HBsAg，制備DC疫苗;用該疫苗治療HBV轉(zhuǎn)基因小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，注射2次DC疫苗就能清除HBV轉(zhuǎn)基因小鼠循環(huán)HBsAg，并產(chǎn)生抗-HBs。
　　Miller等采用鴨胚胎成纖維細(xì)胞(primary duck embryonic fibroblasts，PDEF)，經(jīng)鴨乙型肝炎病毒核心抗原(DHBcAg)的DNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，制備了一種全細(xì)胞疫苗，可持續(xù)表達(dá)DHBcAg。研究指出，PDEF –DHBcAg全細(xì)胞疫苗對DHBV的感染沒有預(yù)防作用，但對DHBV感染后的持續(xù)化有預(yù)防作用;說明接種PDEF –DHBcAg全細(xì)胞疫苗能激發(fā)有效的免疫應(yīng)答并導(dǎo)致DHBV感染的快速清除。
                  責(zé)任編輯：火爆醫(yī)藥視頻招商網(wǎng) 小季    2010年3月12日 13:41:35

 

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