研究冬蟲夏草對抗體形成細胞的作用

添加日期：2010年5月8日 閱讀：1193

　　冬蟲夏草，始載于《本草綱目拾遺》。因其冬季為蟲，夏季為草，故名。為麥角菌科真菌冬蟲夏草Cordyceps sinensis (Berk.) Sacc，寄生蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲上的子座及幼蟲尸體的復合體。主產于四川阿壩藏族自治州松潘、理縣、茂汶羌族自治縣、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉樹、果洛藏族自治州及同德、同仁，云南中甸、德欽、麗江納西族自治縣等地，均為野生。主要功效：益腎補肺，止血化痰，止嗽定喘［1］。本實驗主要研究冬蟲夏草對抗體形成細胞作用，旨在為冬蟲夏草的臨床應用提供科學依據。
　　1  器材與方法
　　1.1  儀器和藥物
　　低溫冷凍離心機（Beckman,美國）；美國Multiskan產全自動酶標儀；恒溫水浴箱（上海）；電泳儀（上海）；100目不銹鋼網。冬蟲夏草（購于附屬醫(yī)院中藥房），取100 g加水1 000 ml，文火煎煮2 h，去渣濃縮為100 ml（濃度為**）備用。
　　1.2  動物及分組
　　取BALB/C純系小鼠24只，體重18～22g，雌雄各半，隨機分為兩組，每組12只，Ⅰ組為生理鹽水對照組，Ⅱ組為藥物實驗組。
　　1.3  方法
　　Ⅰ組用生理鹽水灌胃，1次/d，0.5 ml/(次·只)；Ⅱ組用冬蟲夏草液灌胃，1次/d，0.5 ml/(次·只)，共灌10次。
　　1.4  檢測項目
　　1.4.1  定量溶血分光光度測定法（QHS）［2］
　　本法體外測定B細胞產生分泌抗體裂解紅細胞所釋放的血紅蛋白量（以OD值表示），其結果可反映機體體液免疫功能。實驗第5 天分別將5%的綿羊紅細胞0.2 ml注入各組小鼠腹腔內。第11 天頸椎脫臼處死小鼠，常規(guī)取脾臟，然后脾細胞計數(shù)，調整細胞濃度至1×107/ml，平均每組每只小鼠設3支試管，每管依次加脾細胞懸液，0.2%綿羊紅細胞（SRBC），1∶10新鮮豚鼠血清（補體）各1 ml混勻。另外分別設補體、脾細胞以及SRBC對照管各3支，置37℃水浴溫育1 h，2 000 r/min離心5 min。取上清液用96孔細胞培養(yǎng)板于全自動酶標儀450 nm波長處測OD值，作為QHS反應值。
　　1.4.2  特異玫瑰花環(huán)形成細胞檢測（SRFC）［3］
　　取脾細胞0.1 ml（1×107/ml），1%SRFC 0.1 ml，小牛血清0.1 ml，試管內混勻，4℃放置2 h，加結晶紫溶液20 μl，計數(shù)500個淋巴細胞，求出SRFC/106脾細胞的形成率。
　　1.4.3  血清IgG檢測［3］
　　采用對流免疫電泳實驗，摘除小鼠眼球取血，分離血清，取不同稀釋度血清10 μl加入陰極端瓊脂板孔中，將瓊脂板陽極端孔內加入羊抗鼠IgG(1∶32)10 μl，將對流免疫電泳通電30 min后觀察結果，以血清*高稀釋度仍有明顯沉淀線為準。結果以稀釋度表示。
　　2  結果
　　2.1  冬蟲夏草對抗體形成細胞的影響
　　表1結果顯示，用藥組可促進抗體細胞形成，與對照組相比有顯著性差異（P<0.05）。表1  冬蟲夏草對抗體形成細胞的影響(略)
　　2.2  冬蟲夏草對SRFC的影響
　　表2結果顯示，用藥組SRFC產生明顯增強，與對照組相比有非常顯著性差異（P< 0.01）。表2  冬蟲夏草對SRFC的影響(略)
　　2.3  冬蟲夏草對小鼠IgG的影響
　　表3結果顯示，用藥組可明顯促進IgG產生，與對照組相比有顯著性差異（P < 0.01）。表3  冬蟲夏草對小鼠IgG的影響(略)
　　3  討論
    冬蟲夏草是臨床上常用的中藥�，F(xiàn)代藥理研究證實，冬蟲夏草能顯著增加小鼠血清溶菌酶的含量，極顯著地提高綿羊紅細胞的滴度，也能提高巨噬細胞的吞噬功能，提高淋巴細胞轉化率和自然玫瑰花環(huán)形成率，且能明顯增加血清IgG的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗應激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗腎衰作用。本研究重點從細胞及分子水平探討冬蟲夏草對抗體形成細胞，IgG分子的影響。實驗證明，冬蟲夏草能增強小鼠抗體形成（B細胞）活性，促進B細胞分化、增殖為漿細胞；藥物組與對照組相比有顯著性差異（P<0.05），冬蟲夏草組SRFC數(shù)目明顯高于對照組，與對照組相比有非常顯著性差異（P< 0.01），冬蟲夏草可使小數(shù)血清IgG含量增加，與對照組相比有非常顯著性差異（P< 0.01）。提示如機體免疫功能下降者可口服冬蟲夏草以增強機體免疫功能，預防某些疾病。本實驗結果為臨床應用冬蟲夏草提供了實驗依據。
        責任編輯：小季     4077222.com    2010-5-8 18:48:48

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