探討黃精提取物對小鼠低氧/復(fù)氧損傷的保護作用

添加日期：2010年5月8日 閱讀：1782

　　黃精為百合科黃柏屬多種植物的干燥根莖，具補腎、滋陰潤燥之功，用于滋補強身和治療腎虛精虧、肺虛燥咳以及脾胃虛弱之癥［1］，已有很長歷史，是中醫(yī)常用藥物之一。生長在湖北恩施富硒（恩施是我國的高硒區(qū)）深山叢林中的黃精，由于其富硒而使藥效獨特，療效顯著。本實驗以小鼠為研究對象，建立低氧/復(fù)氧損傷的模型，主要研究黃精提取物對小鼠低氧/復(fù)氧損傷的保護作用，為黃精的臨床應(yīng)用和進一步研究開發(fā)提供理論依據(jù)和參考。
　　1   材料
　　1.1  藥材黃精購于恩施中藥材公司，采用雙道束原子熒光光譜法測定硒的含量為0.58 μg/g。
　　1.2  動物昆明種小鼠30只，體重18～22 g， ♂♀兼用，由同濟醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供。
　　1.3  試劑活性氧（ROS）測定試劑盒、超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒、丙二醛（MDA）測定試劑盒、酸性磷酸酶（ACP）測定試劑盒、過氧化氫酶（CAT）測定試劑盒均為南京建成生物研究所產(chǎn)品，氯胺酮( Ketamine)為美國Sigma公司產(chǎn)品。化學(xué)試劑均為分析純。
　　1.4  供試藥液的制備取適量富硒黃精根莖粗粉，用水煎煮3次，濾過后，濃縮成0.5 g/ml的溶液，攪拌下加入乙醇至含醇量達70%，低溫放置過夜，濾過，回收乙醇，再濾過濃縮制成1 g/ml的水溶液，115℃滅菌45 min，備用，以下簡稱提取物。
　　1.5   儀器
　　TG328A型電子分析天平；RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器；DL-50型超級恒溫器；756MC型紫外可見光分光光度計；GL-20G高速冷凍離心機。
2  方法和結(jié)果
　　昆明種小鼠30只，隨機分為3組，富硒黃精提取物組ig提取液20 ml/kg，對照組ig等量生理鹽水，自由攝食飲水，連續(xù)給藥5周。實驗前30 min陽性藥組ip氯胺酮0.08 g/kg，將小鼠放入鈉石灰瓶（150 ml廣口瓶，10 g鈉石灰）中，每瓶放1只，塞緊瓶塞，8 min后取出，自由呼吸8 min后［2］，將小鼠斷頭取血，放入帶蓋的肝素化試管中，立即蓋緊，按試劑盒說明書測ROS，CAT，SOD，MDA和ACP各項指數(shù)，進行統(tǒng)計學(xué)處理后結(jié)果見表1～2。表1  黃精提取物對小鼠ROS和CAT的影響(略)表2  黃精提取物對小鼠SOD，MDA和ACP的影響 (略)
　　結(jié)果表明：富硒黃精和氯胺酮均能降低ROS，且氯胺酮的作用顯著強于富硒黃精；富硒黃精能增加SOD，CAT活性，氯胺酮能降低SOD活性，但對CAT活性影響無統(tǒng)計學(xué)意義，富硒黃精與氯胺酮均能減少MDA，但兩者作用的差別無統(tǒng)計學(xué)意義，富硒黃精與氯胺酮對ACP影響均無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3  討論
　　小鼠經(jīng)低氧/復(fù)氧應(yīng)激刺激后有大量氧自由基產(chǎn)生，它通過與不飽和脂肪酸作用引發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)生成MDA，氧自由基及MDA通過多種途徑造成細胞膜及亞細胞器膜結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致?lián)p傷［3］。實驗結(jié)果表明，富硒黃精對小鼠低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過氧化損傷有保護作用，谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px是一種重要的抗氧化酶，硒是GSH-Px的活性成分之一，富硒黃精根莖中富含硒，可以提高GSH-Px活力，從而對細胞產(chǎn)生保護作用；SOD是一種內(nèi)源性自由基清除劑，本實驗結(jié)果表明富硒黃精能增加SOD及CAT活性即達到保護作用。氯胺酮能降低ROS及MDA，且降低ROS的作用明顯強于富硒黃精組，表明富硒黃精在小鼠低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過氧化損傷方面的保護作用比氯胺酮要溫和一些，對低氧/復(fù)氧脂質(zhì)過氧化損傷均有保護作用。
        責(zé)任編輯：小季     4077222.com    2010-5-8 18:14:52

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