研究國產(chǎn)加拿大一枝黃花的藥理作用(一)

    添加日期:2010年5月8日 閱讀:1483

      加拿大一枝黃花Solidago canadensis L.為菊科(Compositae)一枝黃花屬(Solidago) 植物,作為泌尿疾病和消炎鎮(zhèn)痛治療藥,在歐洲已有幾百年藥用歷史[1],為《歐洲藥典》收錄的常用植物藥,F(xiàn)代研究證實,歐美等地產(chǎn)加拿大一枝黃花富含黃酮、皂苷及二萜類等化合物,具有抗炎鎮(zhèn)痛、解痙、利尿、抗氧化等廣泛藥理活性[2],在臨床上廣泛使用。本種1935年作為觀賞花卉被引入我國,20世紀(jì)80年代擴散蔓延為雜草,于近年在我國華東、華北、華南等地大面積爆發(fā)性生長,對我國生態(tài)造成了嚴(yán)重威脅[3]。目前國內(nèi)對國產(chǎn)加拿大一枝黃花的研究多集中在生物學(xué)特性及生態(tài)防治方面,化學(xué)成分和藥理作用方面僅見有揮發(fā)油成分和黃酮類,以及抗菌抗氧化活性的報道[4,5],其體內(nèi)活性及毒性研究未見報道。我們**對其鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)咳、祛痰作用、急性毒性進(jìn)行了研究,F(xiàn)將結(jié)果報道如下。
      1  器材
      1.1  動物清潔級昆明種小鼠,體重(20±2)g,雌雄兼用,由中科院上海實驗動物中心提供(動物合格證號: SC XK 滬 2003-0003)。
      1.2  藥物加拿大一枝黃花,200409采于上海,由上海交通大學(xué)藥學(xué)院李曉波教授鑒定。干燥全草粉碎過40 目篩,95%乙醇滲漉提取,回收乙醇后得提取物,干燥備用。
      1.3   試劑吲哚美辛片,上海辛帕斯制藥有限公司,批號 050601;阿司匹林片,上海信誼百路達(dá)藥業(yè)有限公司,批號 0554010;鹽酸依普拉酮片,上海衡山制藥有限公司,批號 040201;氨水,分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司,批號 050120;其他試劑均為國產(chǎn)分析純。
      1.4  儀器YLS-6A 智能熱板儀,山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院設(shè)備站;754型紫外分光光度計,上海精密科學(xué)儀器有限公司。
      1.5  統(tǒng)計軟件SPSS 11.5,進(jìn)行One-Way ANOVA檢驗。
      2  方法
      2.1  鎮(zhèn)痛作用研究[6]
      2.1.1  對熱刺激小鼠痛閾值的影響將健康雌性小鼠置于(55±0.5) ℃ 熱板儀上, 以小鼠舔后足反應(yīng)的潛伏期為痛閾指標(biāo), 記錄小鼠痛閾值,剔除痛閾值小于5 s或大于30 s或跳躍的小鼠, 取預(yù)選合格的小鼠間隔5 min再重新測定痛閾值一次,取兩次痛閾值的平均值作為該鼠給藥前的平均痛閾值。將符合標(biāo)準(zhǔn)的40只小鼠隨機分為蒸餾水組、吲哚美辛組(50 mg/kg)、加拿大一枝黃花低劑量組(相當(dāng)于生藥2 g/kg)、加拿大一枝黃花高劑量組(相當(dāng)于生藥6 g/kg)4組。灌胃給藥,觀察并記錄給藥后30,60,90,120 min 的痛閾值,痛閾值大于60 s的以60 s計。
      2.1.2   對醋酸致小鼠扭體反應(yīng)的影響健康小鼠 40 只,雌雄各半,隨機分為蒸餾水組、阿司匹林組(200 mg/kg)、加拿大一枝黃花低劑量組(相當(dāng)于生藥2 g/kg)、加拿大一枝黃花高劑量組(相當(dāng)于生藥6 g/kg)4組。灌胃給藥30 min 后,腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2 ml/只,觀察并記錄小鼠**扭體時間和15 min內(nèi)小鼠的扭體次數(shù)。按下式計算鎮(zhèn)痛率:
      鎮(zhèn)痛率(%)=蒸餾水組扭體次數(shù)-試藥組扭體次數(shù)蒸餾水組扭體次數(shù)×**
      2.2   鎮(zhèn)咳作用研究[6]40 只健康小鼠,雌雄各半。隨機分為蒸餾水組、鹽酸依普拉酮組(20 mg/kg)、加拿大一枝黃花低劑量組(相當(dāng)于生藥2 g/kg)、加拿大一枝黃花高劑量組(相當(dāng)于生藥6 g/kg)4組。灌胃給藥30 min后,將每只小鼠置于自制的引咳裝置中,使小鼠接受飽和氨水的噴霧刺激5 s,從噴霧氨水開始計時,以腹肌收縮,張大嘴為準(zhǔn),觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期和2 min內(nèi)咳嗽次數(shù)。
      2.3   祛痰作用研究[7]健康小鼠40 只,雌雄各半。隨機分為蒸餾水組、氯化銨組(2 g/kg)、加拿大一枝黃花低劑量組(相當(dāng)于生藥2 g/kg)、加拿大一枝黃花高劑量組(相當(dāng)于生藥6 g/kg)4組。。每只小鼠灌胃給藥30 min 后,腹腔注射5%酚紅生理鹽水溶液10 ml/kg,30 min后脫臼處死,剝離氣管周圍組織,剪下自甲狀軟骨至氣管分支處的一段氣管,放入盛有1 ml蒸餾水的試管中,再加入1 mol/L氫氧化鈉溶液0.1 ml,以1 ml蒸餾水/0.1 ml氫氧化鈉溶液為空白, 546 nm處測量溶液的吸光度,以吸光度A作為評價指標(biāo)。
     2.4   急性毒性實驗[6]LD50的測定:健康小鼠30 只,雌雄各半,按體重隨機分為5組,每組6只,實驗前禁食12 h,可自由飲水;灌胃給藥,劑量分別為:0.1,0.5,2.5,12.5,62.5 g/kg,連續(xù)觀察7 d,每天記錄小鼠體重及死亡數(shù)目,并觀察小鼠反應(yīng)情況。*大耐受量實驗:健康小鼠20 只,雌雄各半,按體重隨機分為蒸餾水組、加拿大一枝黃花組(81.0 g/kg),實驗前禁食12 h,可自由飲水;灌胃給藥,連續(xù)觀察7 d,每天記錄小鼠體重及死亡數(shù)目,并觀察小鼠反應(yīng)情況。7 d后處死全部小鼠,肉眼觀察心、、脾、肺、腎等臟器的變化。

            責(zé)任編輯:小季     4077222.com    2010-5-8 18:31:25

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